建立傣药指纹图谱 （第二届西双版纳发展论坛）

关键词：傣药、指纹图谱 
    内容摘要：我国加入WTO后，参照现代医药研究的国际规范，建立和完善国际认可的中药质量标准—中药指纹图谱，即利用现代检测仪器，获得药材的图谱和数据，借用法医学“指纹”的慨念。傣医药有2000多年的历史，傣族人民长期与疾病斗争中积累了丰富的经验。解放后在继承和发扬傣医药理论和临床诊治方面，取得了显著的成效，但傣药的鉴别，目前仍以肉眼观察为主，对于经加工粉碎的傣药，几种或十几种混合制成膏丹丸散则无法鉴别真伪及含量，因此实现傣医药现代化和科学化，应借鉴中药指纹图谱技术，建立傣药指纹图谱，就等于给每一种傣药或方剂制定特有的“身份证”，只要用仪器检测就知道其真伪及含量，也才能使疗效显著的傣药品种走向全国，走出国门。 

    西双版纳是一个多民族聚集地区，居住有傣、汉、哈尼、拉祜等十多种民族，全州面积19112km2,人口约83万。由于西双版纳地处热带边缘，年温差小（平均差为9.9℃），雨量充沛（年降雨量1100-1800mm），形成高温多雨的气候特点。州内有我国面积最大的一片热带雨林，保存着地球北回归线沙漠带上最为完整的热带雨林生态系统。西双版纳面积仅为全国国土面积的0.2%，而植物种类却有5000多种、动物种类500余种，分别占全国总数的1/6和1/4,因此素有“植物王国”、“动物王国”和“物种基因库”之称。由此可见西双版纳动植物资源十分丰富，这些丰富的资源和气候特点为傣医药的发展提供了重要的物质条件。 
    1.傣医药的历史与现状 
    根据贝叶经的记载，傣医药已有2000多年的历史，在漫长的岁月中，傣族人民总结和积累了许多与疾病作斗争的丰富经验，并用傣文加以记载，逐步形成傣医药体系，但由于历史和文化等原因，傣医药发展缓慢。1978年党的十一届三中全会以后，傣医药获得了发展的机遇，在州政府的领导下，科研人员分别于1981年、1985年和1990年对全州范围的民族医及药物资源进行全面的调查，收集到傣医药手稿和各种手抄本200多份，并收集了部分单方和验方，从中筛选出几十个方剂，经卫生部和省卫生厅审定，有3个方剂和24个品种载入《云南省药品标准》，傣药“亚呼鲁”已列入《中国药典》，并推荐100多个有一定疗效的植物药作为编辑《中国民族药志》和《云南省民族药丛书》的品种，有100多个傣药载入《中国民族药炮制集成》，并整理出版4集《傣药志》，翻译出版《古傣医验方注释》、《挡哈雅》、《嘎牙山哈雅》等，1984年卫生部在“内蒙会议”上正式把傣医列为全国四大民族医（藏、蒙、维、傣）之一，1988年成立州傣医院和州民族医药科研所，此后，傣医药的发展进入到一个新的历史时期。 
    最近十多年来，傣医药的发展取得了长足的进步，为了解决傣医后继乏人的问题，州卫生局分别于1986年和1999年在州卫校开办傣医中专班，并编写了43万字的《傣医临床课教材》用于教学，同时召开傣医座谈会和学术交流会，请老傣医介绍诊治经验，为21名老傣医配备徒弟，使他们的临床经验得以继继承和发展，继续整理和翻译傣医学理论体系“四塔”、“五蕴”。1999年州民族医药研究所向国家中药管理局申报《名傣医康朗香临床经验总结学术思想探讨》等4个科研课题。完成卫生部中标课题“傣医风证辨治”等。从2000年起，把傣医药科研经费纳入财政预算。2001年傣药制剂“雅叫帕中补”（版纳内正丸）和“珠子肝泰胶囊”获准上市，目前对数十个傣药方剂进行临床研究。 
    运用现代的化学分析方法研究傣药的有效成分是继承、提高和发展傣医药的重要手段，其主要内容是研究傣药有效成分的提取、分离和鉴定，应以傣医传统用药为线索，结合药理实验，寻找有价值的治疗药物。笔者于20世纪90年代对几十种具有清热解毒、消炎止痛的傣药进行抑菌试验，结果发现缅茄[Afzelia  xylocarpa (Kurz )craib]和紫雪花（Plumbago  indica  L）两种傣药抑菌作用比板蓝根和穿心莲强数倍，与黄连素相当，临床应用显示对咽喉肿痛、发热咳嗽有较好的疗效。 
    傣医药历来医不离药，药不离医，无医则药废，无药则医亡，其用药特点以鲜品为主，随着经济的发展，人口的增多，森林植被的破坏，药物资源逐渐减少，采挖野生植物难以满足医疗所需，例如上述的缅茄，为落叶乔木，据20世纪90年代的调查，在勐腊县内仅存一棵，其他地方未见其踪迹，笔者作抑菌试验时，取自热作所人工栽培的几十棵缅茄的树叶，而傣医用其根和皮，其抗菌活性成分的含量以根、皮最高，其次为叶、花。因此建立一个傣药生产基地和加工车间就显得非常必要。 
    2.中药指纹图谱的研究慨况  
    我国加入WTO后，参照现代医药学研究的国际规范，建立和完善中医药特点和国际认可的中药质量控制标准，并推广至天然药物的研究和开发中，这是实现中药现代化的基础工作，中药指纹图谱是完善中药质量标准的有益探索，利用现代信息获得药材及其制剂的图谱和数据，借用法医学的“指纹”慨念，称中药指纹图谱。它是制定中药质量标准中针对其中成分复杂性和缺乏用以鉴定成分所需的化学对照品这一症结而产生的一种方法，将某种中药经处理后，采用一定手段，得到能标示该中药特性的共有峰的图谱，它强调“群体内的唯一性”，要求图谱具有指纹特征。 
    根据《中国药典》记载，长期以来，中药质量检验方法非常简单。一直采用外观形态的经验鉴别；1963年开始采用重量法和容量法；1985年进一步用分析化验法；直到1990年才开始采用气相/液相色谱等现代仪器进行分析鉴定。中药指纹图谱的建立就是运用现代分析仪器与计算机相结合，对中药的质量进行检测，突破了传统中药质量控制的诸多缺陷，已为国内外医药学专家认可并达成共识。 
    现代的中药质量控制模式类似化学药品的检测方法 ，对于结构清楚、单一的药品可作为判断药物优劣的指标，但中药由于成分复杂、多用复方，少则几味，多则十几味组成方剂，测定单一成分已不能准确反映其质量标准，因此国家药典委员会的专家于2000年开展中药指纹图谱的研究工作，从药材的种植、加工和制剂等各个环节进行样品分析，通过相似性和相关性，建立完备的中药质量评价体系，目前中药指纹图谱技术已成功应用于黄芩、砂仁、贝母、苦丁茶、细辛、黄芪、蟾酥、海马、蛇床子、大黄、龙胆、人参等中药材的鉴定分类，且与基原鉴定结果一致，还用于华佗再造丸、乌鸡白凤丸、复方丹参滴丸等方剂的分析鉴定。 
    2003年，国家食品药品监督管理局颁布《中药注射剂指纹图谱检测标准研究指导原则》以后，我国中药注射剂指纹图谱的研究取得了很大的进展，国家科技部把指纹图谱列入“十五”重点攻关项目。 
    2004年，中医药管理局组成专家鉴定会，通过了“十五”科技攻关重大项目“复方丹参滴丸指纹图谱分析及质量控制技术”，为保持复方丹参滴丸工艺稳定，从中药材到提取物实行全程质量控制，以多元色谱分析鉴定出30 多种成分，并首次创建了多元图谱相似度计算分析软件系统，保证研究结果的可验证性和重现性，从而使各批次的复方丹参滴丸中的有效成分含量一致，确保质量稳定，为复方丹参滴丸获得美国药品和食品管理局（FDA）的批准进入美国市场铺平道路。 
    3.建立傣药指纹图谱 
    傣药的质量鉴别目前仍以肉眼观察为主，对于经过加工粉碎后几种或几十种混合制成的膏丹丸散则无法鉴别其真伪及含量，傣药与中药同属于天然药物，而且很多药材具有相同性和相似 性，只有部分药材为西双版纳所特有，因此可借鉴中药指纹图谱的方法，建立傣药指纹图谱，实现傣医药现代化和科学化，就等于给每一种傣药或方剂，制定特有的“身份证”，只要用仪器检测就知道其真伪及含量，也才能使疗效显著的傣药品种走向全国，走出国门。其方法有光谱、色谱等，单纯的光谱法限于作总量测定，也能作药材鉴别，但它得到的药材组分的光谱叠加而形成指纹图谱，不利于组分的进一步研究，而色谱和光谱联用则被广泛用于指纹图谱，目前主要有以下几种方法。 
    3.1 薄层色谱（TLC），操作简单、快捷、经济、提供直观形象，用可见光或荧光配合色谱扫描和数据处理，可得到不同层次的轮廓图谱，不足之处是一种开放性色谱，对外界环境要求高，由于器材差异而导致重现性较差，不能满足指纹图谱的要求，可作为药材的一般性鉴别。 
    3.2 气相色谱（GC），分离率和灵敏度均较高，分析速度快捷，适用于含挥发油的药材。 
    3.3 紫外分光光度法（UV），利用物质分子吸收一定量光子后，引起分子轨道上电子所产生的吸收光谱，广泛应用于药材和药物鉴定。 
    3.4 磁谱(MS)，由于各种药材或药物电磁效应的差别形成不同的图谱，常用于药物鉴定或未知成分的检测。 
    3.5 高效液相色谱（HPLC）,具有稳定性好、柱效高、应用范围广等特点，是指纹图谱常用的方法，应用梯度洗脱，使图谱分析时段保持峰形尖锐，分离效果也较好，还可获得三维图谱，与其他方法联用效果更佳，如HPLC/MS、HPLC/UV等，国外于20世纪80年代已广泛用于植物药的鉴别。 
    3.6  X-射线衍生法（XDR），，物质被X射线照射后产生不同程度的衍射现象，只要药材成分含量固定，其衍射图谱可作为该药材的特征图谱，多用于动物药的鉴别。 
    4.指纹图谱与傣医药的可持续发展 
    目前中药指纹图谱已被国际公认，FDA允许药材或药物保健品申报资料提供指纹图谱，世界卫生组织（WHO）于1996年颁布《草药评价标准原则》，其中提到：“草药质量的稳定性单靠测定已知成分是不够的，

本文责编：帕相