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傣族药肝保宁胶囊药效学研究
作者:韩颖 周起均 李永松 高心湘 陈锡强 任磊 x    点击率:3459  转自:北京大学出版社 更新时间:2011/5/11 15:34:05

傣族药肝保宁胶囊药效学研究

    昆明市生物技术工程研究中心(650021)韩颖 周起均 李永松 高心湘 陈锡强

    昆明市中医医院(650011)任磊

    叶下珠,傣文名“牙海巴”,为大戟科叶下珠属植物,全草,傣医常用于治疗肝炎、赤白痢等。中医药典籍也认为,叶下珠味甘苦、凉,入肝肺二经,有平肝清热、利水解毒、消疳止痢的功能。根据傣医应用叶下珠治疗肝炎的经验,用叶珠提取物研制开发了具有良好保肝作用的民族药制剂肝保宁胶囊。现将有关药效学研究结果报告如下:

    1 材料与仪器

    1、1 材料

    药材:叶下珠,采于西双版纳,经中科院昆明植物研究所李恒研究员鉴定为大戟科叶下珠属植物叶下珠Phyllanthus urinaria Linn.。联苯双脂:北京协和制药厂(批号940509)。D--半乳糖(D-Gal):重庆医学院(批号:(940908)。四氯化碳(CCI4):华西医科大学(批号:941103)。氢化可的松:上海第九制药厂(批号:871102)。

    试剂:乙醇、醋酸乙脂等均为市售。

    动物:昆明种小鼠,18~22g,云南省药品检验所繁育室提供。SR小鼠,22 2g,同批实验中性别一致,四川抗菌素研究所提供。

    1、2 仪器:真空旋转蒸发器(BUCH117),全自动系列化分析仪(岛津CL--7000),分光光度计(721型)。

    2 方法

    2、1 制备

    叶下珠干燥全草,洗净,粉碎,用80%乙醇冷浸提取5次,合并提取液,用真空旋转蒸发器低温浓缩,浓缩液用水沉法除杂,浓缩后低温干燥。

    2、2 药效学实验研究

    2、2、1 对CCI4引起的实验性肝损伤的影响

    SR小鼠60只,雌性,随机分为6组,每组10只,除正常对照组,各组腹腔注射CCI4140mg/kg,随后实验组予叶下珠干浸膏46mg/kg.d、140mg/kg.d、460mg/kg.d ;阳性对照组予联苯双脂 200mg/kg.d;模型对照组和正常对照均给予同体积蒸馏水,连续灌胃给药5天,于最末一次给药后15小时,断头处死动物,取血测定SGPT,同时取肝脏进行病理组织检查。

    2、2、2 对D-Gal引起的实验性肝损伤的影响

    SR小鼠60只,雌性,随机分为6组,每组10只,实验组予叶下珠干浸膏46mg/kg、140mg/kg、460mg/kg;阳性对照组予联苯双脂 200mg/kg;模型对照组和正常组均给予同体积蒸馏水,于12小时内各灌胃给药3次,并于第1次灌胃的同时,除正常对照组,各组腹腔注射D-Gal 200mg/kg。 于是末一次给药后12小时,断头处死动物,取血测定SGPT和胆红素,同时取肝脏进行病理组织检查。

    2、2、3 小鼠碳粒廓清试验

    昆明种小鼠40只,随机分为4组,每组10只,空白对照组予蒸馏水,药物组和可的松+药物组予叶下珠干浸膏25mg/kg.d,灌胃给药后15天。可的松组和可的松+药物组于13天起,以可的松100mg/kg.d,皮下注射。于最末一次给药后30min,尾静脉注射印度墨汁(1→稀释)0.1ml/10g,注射后1min及10min从眼后静脉丛取血40μl,置于2ml0.1Na2CO3溶液中摇匀,置721型分光光度计在波长680nm下测定光密度(OD),按下式计算廓清指数K。

    K=(logOD1-logOD2)/(t2-t1)

    式中OD1和OD2为1min和10min所取血样的光密度,t2-t1为取血时间差。

    3 结果

    3、1 对CCl4引起的实验性肝损伤的影响

    实验结果见表1。

    表1 叶下珠对四氯化碳肝损伤的保护作用

    动物数 SGPTX±SD

    正常对照组 10 54.57±9.93

    CCl4模型组 10 90.34±52.65

    联苯双脂组 10 52.01±29.23

    实验组:46mg/kg.d 10 62.63±22.17

    140mg/kg.d 10 59.44±11.31

    460mg/kg.d 10 55.77±12.13

    注:*P<0.01,与空白组比较。**P<0.05与模型组比较。***P<0.01,与模型组比较。

    病理组织检查:各组大体观察无异常。显微镜观:CCl4模型组出现明显病理改变,主要损害为细胞胞浆疏松,嗜酸性变,脂肪样变,嗜酸性小体,细胞点状和灶状坏死。而正常对照组、联苯双脂组、实验组(46mg/kg.d~460mg/kg.d)肝细胞、小叶、汇管区均无异常。

    3、2 对D-Gal引起的实验性肝损伤的影响

    实验结果见表2。

    表2 叶下珠对D--半乳糖急性肝损伤的保护作用

    动物数 SGPTX±SD

    正常对照组 10 81.44±31.67

    CCl4模型组 10 142.20±60.46

    联苯双脂组 10 82.37±39.37

    实验组:46mg/kg.d 10 109.45±26.79

    140mg/kg.d 10 98.41±42.36

    460mg/kg.d 10 69.17±36.28

    注:*P<0.01,与空白组比较。**P<0.05与模型组比较。***P<0.01,与模型组比较。

    表3 叶下珠对D-半乳糖急性肝损伤小鼠胆红素的影响

  动物数 SGPTX±SD

    正常对照组 10 8.06±2.23

    CCl4模型组 10 12.94±7.92

    联苯双脂组 10 8.22±3.88

    实验组:46mg/kg.d 10 10.13±2.17

    140mg/kg.d 10 8.94±4.06

    460mg/kg.d 10 8.07±3.62

    注:*P<0.01,与空白组比较。**P<0.05与模型组比较。***P<0.01,与模型组比较。

    病理组织检查:各组大体观察无异常。显微镜观:CCl4模型组肝细胞明显变性,主要为细胞浊肿,嗜酸性变,脂肪样变,核体消失,并可见肝细胞点状和灶状坏死。而正常对照组、联苯双脂组、实验组(46mg/kg.d~460mg/kg.d)均未见异常。

    3、3 小鼠碳粒廓清试验

    实验结果见表4。

    表4 叶下珠对小鼠血中胶体碳粒清除速率的影响

  动物数 OD1 OD2 KX±SD

    对照组 10 0.036 0.029 0.011±0.004

    可的松组 10 0.033 0.029 0.0066±0.0029

    药物组 10 0.035 0.025 0.014±0.003

    可的松+药物组 10 0.033 0.026 0.012±0.004

    注:*P<0.01,与对照组比较。**P<0.05与可的松组比较。***P<0.01,与对照组比较。

    叶下珠与空白对照组比较对正常小鼠的碳粒廓清速率无明显影响,与可的松合用时可拮抗可的松的作用,经t检验,与空白对照组比有非常显著的差别(P<0.01)。

    4 结论

    肝炎是由感染因子如病毒或化学因子如药物、化学品、酒精等引起的肝脏疾病。由于本病常导致肝脏慢性病变,最终可形成肝硬化和肝癌,是严重危害人类,特别是我国人民健康的疾病。肝炎在活动期通常表现为肝脏损伤,出现谷丙转氨酶(SGPT)升高、黄疸及肝细胞病变等,因此保肝治疗是非常必要的。叶下珠是傣族常用民族药,很久以来就作为肝炎治疗药物广为使用。实验研究结果证实,叶下珠具有良好的保肝降酶作用,小鼠灌胃给药46mg/kg.d~460mg/kg.d。可非常显著的抑制四氯化碳引起的血清SGPT活性升高和D--半乳糖引起的血清SGPT活性和胆红素升高,且存在明显量效关系。对小鼠肝损伤的形态改变有明显的保护和改善作用。其作用与联苯双脂相当。并可拮抗可的松对小鼠单核细胞吞噬功能的抑制作用,提示对网状内皮系统的活性有保护作用。

    另据报道,叶下珠具有抗乙型肝炎病毒作用。根据对其进行的体内抗鸭乙型肝炎病毒研究结果表明,500~1000mg/kg剂量可非常显著地降低鸭血DHBV--DNA水平。(研究结果另文发表)


 

 

 

 

 

本文责编:帕相


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